产品货号：
BTN70102A
中文名称：
蛋白marker(3.3～20.1kD)
英文名称：
Protein Marker(3.3-20.1kD)
产品规格：
15次
发货周期：
1～3天
产品价格：
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本制品包含3种多肽和2种低分子量蛋白质组成，分子量范围为3.3kD～20.1kD。可以用来判断SDS-PAGE上多肽和小蛋白的分子量。本品为蛋白质和多肽混合物的冻干粉，每种蛋白含量约为15～22.5μg，配有一支1×上样缓冲液。
| 组分 | 规格 |
| 超低分子量蛋白Marker(3.3～20.1kDa) | 15T |
| 1×Loading buffer | 150μL |
保存：-20℃，有效期1年。
- 开封后，溶于150μL 1×Loading buffer，沸水浴5分钟，可根据需要进行小量分装，每管10μL，-20℃贮存，每次取一管使用，避免反复冻融。
- 使用前取分装后的小管室温融化后，沸水浴5分钟即可上样电泳，用考马斯亮蓝G-250染色后可见5条蛋白带。
附I：凝胶的配置方法
| 分离胶 | 夹层胶 | 浓缩胶 | |||
| 20%/4.5mL | 16.5%/4.5mL | 15.5%/4.5mL | 10%/2mL | 4%/2mL | |
| 49.5%T 3%C | / | / | / | 0.407mL | 0.160mL |
| 49.5%T 6%C | 1.82mL | 1.50mL | 1.395mL | / | / |
| 凝胶缓冲液 | 1.50mL | 1.50mL | 1.50mL | 0.667mL | 0.496mL |
| 甘油 | 0.48mL | 0.48mL | 0.48mL | / | / |
| ddH2O | 0.70mL | 1.02mL | 1.125mL | 0.926mL | 1.344mL |
| 10%APS | 40μL | 40μL | 40μL | 20μL | 20μL |
| TEMED | 5μL | 5μL | 5μL | 3μL | 3μL |
附II：凝胶制备及染色注意事项
- 先配制分离胶，聚合后再配制夹层胶，最后配制浓缩胶，3种胶的制胶体积比为4:1.5:1。电泳时，30v跑1～2小时后，待指示前沿到达分离胶上沿时，把电压调至100v，至电泳结束，整个电泳过程大约需要6～8小时。
- 由于多肽所含的氨基酸数目较少，因此如该多肽含有过多的极性氨基酸(碱性或酸性)，则会影响其在SDS-PAGE图上的条带迁移率，即其表观分子量可能和多肽的氨基酸理论推算分子量有一定距离。
- 由于SDS-PAGE的图谱上，蛋白质对数分子量和迁移率成正比直线关系的分子量范围为15,000-200,000，因此对于分子量小于10000的蛋白质或多肽的分子量，只能根据标准分子量进行估计，推断其是否落入预测的分子量范围。
- 由于超低分子量多肽（3000及3000以下），极易从凝胶上浸出，因此染色及脱色时间不宜太长，脱色后凝胶也不宜在水中浸泡保存过久，否则条带会消失。
- 电泳之后可将胶置于固定液中固定20分钟，再进行染色，能得到较好的蛋白条带；如时间不允许，也可不进行固定直接染色。如果使用配方7进行染色时效果不好或考虑其毒性，请选择本公司的考马斯亮蓝蛋白胶快速染色液(货号:QN1106，该产品具有染色快，无毒，灵敏性高等特点，是常规染色液的替代品。
附III：小分子蛋白质SDS-PAGE电泳试剂配制
- 49.5%T 3%C (配制夹层胶和浓缩胶)
丙烯酰胺48g
甲叉双丙烯酰胺1.5g
用ddH20溶解后定容至100mL - 49.5%T 6%C (配制分离胶)
丙烯酰胺46.5g
甲叉双丙烯酰胺3.0g
用ddH20溶解后定容至100mL - 凝胶缓冲液
Tris碱182g
ddH20 300mL
用HCl调节pH值至8.45
用ddH20定容至500mL
再加入SDS 1.5g - 10×阳极缓冲液(下槽缓冲液〕
Tris碱121.1g
ddH20 400mL
用HCl调pH值至8.9
用ddH20定容至500mL - 阴极缓冲液(上槽缓冲液)
Tris碱12.11g
Tricine 17.92g
SDS 1g
用ddH20定容至1000mL
此溶液不用调节pH值 - 固定液
0.5%戊二醛
30%乙醇
用ddH20定容至100mL - 染色液
50%甲醇
10%乙酸
0.2%考马斯亮蓝G-250
用ddH20定容至500mL
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